Flow cytometry ใช้เพื่อตรวจสอบผลลัพธ์ของการวิเคราะห์

Flow cytometry ใช้เพื่อตรวจสอบผลลัพธ์ของการวิเคราะห์ seq scRNA ซึ่งพบเปอร์เซ็นต์ที่ลดลงของกฎระเบียบ T-เซลล์ที่แสดง c-Maf ซึ่งเป็นปัจจัยการถอดความที่เข้ารหัสโดยยีน musculoaponeurotic fibrosarcoma จากนั้นจึงใช้หนูไขกระดูกไขกระดูกเพื่อยืนยันบทบาทอิสระของเซลล์ของ TfR1 ในการแยกแยะความแตกต่างของเซลล์ T ควบคุม ที่แสดง c-Maf ซึ่งคิดว่าขึ้นอยู่กับธาตุเหล็กภายในเซลล์ จากนั้นทีเซลล์ควบคุมที่บกพร่อง TfR1 ถูกนำไปที่ RNA seq เพื่อทำความเข้าใจโปรแกรมการถอดรหัสที่สื่อกลางโดย TfR1 ในเซลล์ควบคุมควบคุม การวิเคราะห์การถอดเสียงที่เป็นกลางของ T-cells ที่ควบคุมโดยเหนี่ยวนำที่ไม่ถูกบำบัดและกระตุ้นธาตุเหล็กได้ดำเนินการเพื่อกำหนดกลไกที่การแสดงออกของ c-Maf ได้รับการส่งเสริมด้วยธาตุเหล็ก ผลลัพธ์ ระดับ ธาตุเหล็ก ในเซลล์สูงมีความสำคัญต่อการสร้างความแตกต่างของกฎระเบียบ T-cells ในลำไส้และส่งเสริมการแสดงออกของ c-Maf และปัจจัยกระตุ้นการขาดออกซิเจน 2-alpha (HIF-2α) ซึ่งทั้งสองอย่างนี้มีความสำคัญต่อความทนทานต่อภูมิคุ้มกันในลำไส้